目前circRNA pull-down技術絕大部分的報道都是基于接口序列附近的互補序列設計探針進行捕獲,由于環狀RNA和對應序列的高度相似性,僅僅通過接口附近序列設計互補探針很難完全排除來源基因的干擾,有些分子甚至沒法設計出理想的捕獲探針。
本實驗采用一種標簽特異性環狀RNA,在公司circRNA過表達載體技術基礎上,通過將RNA標簽體系引入環狀RNA中;通過RNA標簽和捕獲蛋白的高度特異且穩定相互作用,進行靶分子捕獲和相互作用分子的捕獲和捕獲產物檢測。通過circRNA過表達載體引入外源標簽,可以非常有效的去除來源基因的背景干擾,使此實驗體系中獲得的標簽特異性環狀RNA捕獲特異性更強,效率更高。
實驗流程
實驗結果展示
